western blot后期处理,western blot 结果处理

大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于western blot后期处理的问题，于是小编就整理了3个相关介绍western blot后期处理的解答，让我们一起看看吧。

1. 小木虫western blot蛋白提取出来后怎么处理？
2. Western Blot为什么必须要用内参？
3. western图photoshop将背景调？

小木虫western blot蛋白提取出来后怎么处理？

最好的办法就是进行蛋白定量以后，取所需体积，用上样缓冲液稀释，煮沸，冷却后离心直接上清上样。但是如果要保存的话就需要根据蛋白样品的特点来决定了。如果蛋白的浓度高，对蛋白酶也不敏感的话，可以直接分装冻存。但是一般情况下，还是会建议添加少量蛋白酶抑制剂，有必要的话添加甘油，分装冻存。但是保存时间越长，蛋白质量越低，越容易降解，后续做WB出现弥散，或者是多条条带的情况可能会出现。新鲜样品的效果还是会比较好。

Western Blot为什么必须要用内参？

在 Western Blot 中使用内参其实就是在 WB 过程中另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。

此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个 Western Blot 显色或者发光体系是否正常。

常用的蛋白质内参有 GAPDH 和细胞骨架蛋白 beta-actin 或 beta-tubulin。 一般要选择一个在处理因素作用的条件下蛋白含量不会发生改变的蛋白作内参。——厚百 Western Blot试剂以下是常见的内参：

内参名称 分子量大小 适用范围Beta-actin 43 kDa 胞浆和全细胞GAPDH 30-40 kDa 胞浆和全细胞Tubulin 55 kDa 胞浆和全细胞VCDA1/Porin 31 kDa 线粒体COXIV 16 kDa 线粒体Lamin B1 66 kDa 细胞核TBP 38 kDa 细胞核

western图photoshop将背景调？

处理western blot 照片和其他照片没什么不一样 主要就是要把一些过深的背景去除掉，仅仅保留条带就可以了（千万不要伪造条带，学术***很容易被查出来的） photoshop中有图像选项，其下拉菜单中有调整选项，由该选项可以拉出数个选项，其中一项是曲线，会出现一个对话框，该对话框的下部有三个并排的图标，分别表示将图像背景加深、适中、及变浅。

将鼠标点击一下变浅的图标，再到图像的空白区域点一下就行了

到此，以上就是小编对于western blot后期处理的问题就介绍到这了，希望介绍关于western blot后期处理的3点解答对大家有用。